詳細介紹
上海樊克生物科技詳細為您講述人抗透明帶抗體(aZP)ELISA檢測試劑盒操作步驟,操作步驟,用途,性能,價格,使用說明書等資訊,本司專業(yè)經(jīng)營進口/國產(chǎn)ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,金標檢測試劑盒,白介素試劑盒,為客戶提供免費代測服務(wù),一周內(nèi)出結(jié)果,ELISA試劑盒種屬涵蓋大鼠,小鼠,人,豚鼠,羊,牛,兔,雞,豬,狗,植物,魚,馬及其他動物,了解更多種屬咨詢!
中文名:人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒
別名:人抗透明帶抗體(aZP)ELISA Kit
貨號:fk-m0091
供應(yīng)商:上海樊克
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
范圍:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。
特點:敏感性高、特異性強、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
常見ELISA試劑盒:白介素、選擇素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、干擾素、轉(zhuǎn)化生長因子、趨化因子、細胞因子受體、粘附分子、生長因子、凋亡因子等等。
樣本類型:適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞上清、組織勻漿等樣本。
實驗準備:
1. ELISA試劑盒及待測樣本
2. 酶標儀(450nm波長濾光片)
3. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭
4. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
5. 吸水紙
人抗透明帶抗體(aZP)ELISA檢測試劑盒操作步驟標本要求:
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5. 培養(yǎng)細胞:
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6. 組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融 .
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%
檢測范圍:
0.2IU/L - 6IU/L
人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒操作步驟:
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,依次進行稀釋數(shù)倍。
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
人抗透明帶抗體(aZP)ELISA檢測試劑盒操作步驟注意事項:
1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照人抗透明帶抗體(aZP)ELISA檢測試劑盒說明書嚴格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
2.若不同批號人抗透明帶抗體(aZP)ELISA檢測試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3.反應(yīng)時間的誤差,做大量標本時,*孔和zui后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動為正?,F(xiàn)象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標本做奇數(shù)次復(fù)檢。
5.加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響*,建議校對加樣器。
ELISA試劑盒的儲存及有效期:
1. 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。
2. 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
注意:
試劑盒內(nèi)酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在*實驗后1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準,保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。