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DNA 測序

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更新時間:2017-07-12 12:37:34瀏覽次數(shù):421

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產(chǎn)品簡介

DNA測序原理

DNA測序技術(shù)主要依據(jù) Sanger 的雙脫氧鏈終止法。

詳細介紹

樣品要求

樣品類型

相應(yīng)要求

 

 

菌體

1. 說明載體抗性類型,我們提供 Amp, Kan, Tet 及 Chl 四種抗生素。 
2.   提供 1ml 左右過夜培養(yǎng)的菌液,加 15% 滅菌甘油,于 Eppendorf 管中封口保存,防止交叉污染或滲漏。 
3.   大量樣品測序,建議在一次性塑料培養(yǎng)皿固體培養(yǎng)基上穿刺培養(yǎng)。 
4.   建議盡量提供穿刺培養(yǎng)的菌種。

 

質(zhì)粒

1. 質(zhì)粒溶于適量體積雙蒸水中(不含 TE ),電泳檢測總量大于 2mg 。

2. 建議用相關(guān)試劑盒純化。 
3. 如有可能,同時提供 1ml 含有相應(yīng)質(zhì)粒的菌液備用。 
4. 大質(zhì)粒必需注明載體長度。

 

未純化 PCR 產(chǎn)物

1. 片段大于 150bp 。 
2. 提供 50ul ~ 100ul PCR 擴增產(chǎn)物 ( 總量 500ng-1ug) 。 
3. 取 3ul 樣品,電泳檢測應(yīng)為明亮的一條帶,無雜帶。

 

純化 PCR 產(chǎn)物

1.PCR 產(chǎn)物溶于雙蒸水中(不含 TE )。

2. 濃度大于 20ng/ul ,體積大于 20ul ,長片段需適當(dāng)增加量。 
3. 電泳檢測條帶專一。

自備的引物

1. 濃度不低于 5pmole/ul( 或 5umol/L) ,體積大于 20ul 。 
2. 隨機引物和簡并引物不能用于測序。 
3. 盡可能提供引物全序列、 PCR 退火溫度

 

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