詳細(xì)介紹
dNTP用途
高質(zhì)量的脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 對(duì) PCR 、 RT-PCR 、測(cè)序和標(biāo)記等反應(yīng)的成功都非常重要; PCR反應(yīng)中 dUTP 替代 dTTP ,導(dǎo)致產(chǎn)物中含有尿嘧啶,這種摻入適用于很多應(yīng)用,將尿嘧啶- N -糖基化酶 UNG酶(有時(shí)稱為UDG) 加入到 PCR 反應(yīng)中,可切割任何污染PCR產(chǎn)物中的尿嘧啶,從而避免錯(cuò)誤的形成,這在臨床 PCR 診斷試劑中應(yīng)用非常廣泛。如果四種脫氧核糖核苷酸的濃度不*,將大大增加聚合酶的錯(cuò)配機(jī)率;如果純度不高,或者混有甲基化的脫氧核糖核苷酸將造成產(chǎn)物的甲基化;或者含有脫氧核糖核苷一磷酸、脫氧核糖核苷二磷酸也會(huì)降低聚合酶的聚合能力。
dNTP特征
• 特異性吸光值:
Nucleotide | 250/260 | 280/260 |
dATP | 0.80 ± 0.03 | 0.15 ± 0.03 |
dCTP | 0.80 ± 0.03 | 0.96 ± 0.03 |
dGTP | 1.15 ± 0.03 | 0.67 ± 0.03 |
dTTP | 0.60 ± 0.03 | 0.70 ± 0.03 |
dUTP | 0.73 ± 0.03 | 0.38 ± 0.03 |
• zui大吸收波長(zhǎng)
| l max. |
dATP | 256nm |
dCTP | 252nm |
dGTP | 271nm |
dTTP | 267nm |
dUTP | 262nm |
• HPLC 分析, 脫氧核糖核苷三磷酸的純度> 98%