上海篤瑪生物科技有限公司多克隆抗體供應(yīng)說明：兔抗人BCL2相關(guān)athanogene4多克隆抗體

英文名稱：Rabbit anti-human BCL2-associated athanogene 4 polyclonal Antibody

篤瑪生物兔抗人BCL2相關(guān)athanogene4多克隆抗體
抗體原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。

操作步驟

方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法：
包被：用0.05M PH9.6 碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌，下同)。
5%脫脂乳（SMP）或者BSA 37℃（或者RT封閉）封閉1小時(shí)。棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。
3. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
4. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
5. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
6. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
7. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)O·D值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔 中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。
同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml， 37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

試劑器材

1. 試劑
(1) 包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液): Na?CO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸餾水至1000ml
(2) 洗滌緩沖液(PH7.4 PBS)：0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
(3)稀釋液：牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。
(4) 終止液(2M H2SO4）： 蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸): 0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml 0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸餾水50ml。
(6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液: TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml 底物緩沖液(PH5.5) 10ml 0.75%H2O2 32μl(7) ABTS使用液: ABTS 0.5mg 底物緩沖液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl
(8)抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。
(9) 正常人血清和陽性對(duì)照血清。

2. 器材:
(1) 聚苯乙烯塑料板(簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板)40孔或96孔，ELISA檢測(cè)儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。
(2) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。 (3) 4℃冰箱，37℃孵育箱。

上海篤瑪生物科技有限公司供應(yīng)產(chǎn)品信息

DMD0724    大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0725    大鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0726    大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0727    大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0728    大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0729    大鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0730    大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0731    大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0732    大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0733    大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0734    大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0735    大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0736    大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0737    大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0738    大鼠抗凝血酶受體(ATR)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0739    大鼠凝血酶受體(TR)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0740    大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0741    大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0742    大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0743    大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0744    大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0745    大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0746    大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0747    大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0748    大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0749    大鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0750    大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0751    大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0475    大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0752    大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0753    大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0754    大鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0755    大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0756    大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0757    大鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0758    大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0446    大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0759    大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0760    大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0761    大鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0762    大鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0763    大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0764    大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒     96T/48T
DMD0765    大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0766    大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0767    大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0768    大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0769    大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0770    大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0265    大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0771    大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0772    大鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0773    大鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0264    大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0774    大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0775    大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0776    大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0777    大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0778    大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0779    大鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0780    大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0781    大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0782    大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0783    大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0784    大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0406    大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0785    大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0786    大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0787    大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0788    大鼠水通道蛋白2(AQP-2) ELISA試劑盒     96T/48T
DMD0789    大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0790    大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0791    大鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0792    大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0793    大鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0794    大鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0795    大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0796    大鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0797    大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0798    大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0799    大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒    96T/48T
DMD0800    大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒    96T/48T