克倫特羅ELISA快速檢測方法
克倫特羅屬于β-興奮劑類藥物，可以提高脂肪型動物的瘦肉率和加速動物生長。8.3 當(dāng)板間差異性大時，可能原因是板與板之間孵育時間相差太大，板與板之間洗滌不一致，移液槍使用不當(dāng)，溫度不同等。
克倫特羅屬于β-興奮劑類藥物，可以提高脂肪型動物的瘦肉率和加速動物生長。目前由于多起克倫特羅中毒事件且出現(xiàn)了死亡案例，因此被禁止使用。克倫特羅ELISA快速檢測試劑盒與經(jīng)典色譜法相比，具有操作過程簡單、樣品處理快捷，可同時分析多個樣品，分析時間短、成本低、靈敏度高且對環(huán)境污染小等優(yōu)點。
1 原理
ELISA方法的基本原理是酶分子與抗體或抗體分子共價結(jié)合，此種結(jié)合不會改變抗體的免疫學(xué)特性，也不影響酶的生物學(xué)活性。此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。
2 試樣的準(zhǔn)備
2.1 對于尿樣可直接用于檢測，或者樣品比較渾濁時，可適當(dāng)離心。當(dāng)尿樣冷凍時，應(yīng)將尿樣回溫再測。
2.2 飼料樣品要按照說明書的處理步驟進行。當(dāng)然，為保證樣品充分被提取，可適當(dāng)延長渦旋時間、離心時間及離心轉(zhuǎn)數(shù)。
3 試劑的準(zhǔn)備
3.1 不同批次的試劑盒不能混用，因為抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。
3.2 按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正。
3.3 從冰箱中取出的實驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次實驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存。
3.4 檢測過程中應(yīng)盡量保持室溫20~25℃，避免在通風(fēng)口操作，溫度過低、過熱或蒸發(fā)都會影響檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。同樣不應(yīng)再陽光直射下實驗，防止過熱或蒸發(fā)帶來影響。
4 加樣
4.1 在ELISA中一般有4次加樣步聚，即加標(biāo)本或樣品、酶結(jié)合物、底物、終止液。加樣時應(yīng)將所加物加在板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡，當(dāng)有氣泡時可用干凈的槍頭小心刺破。
4.2 加標(biāo)準(zhǔn)及樣品時一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中，每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染。
4.3 在加酶標(biāo)物、底物、終止液時，建議盡量使用多道移液槍，以縮短反應(yīng)時間。尤其是酶標(biāo)物和底物液用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。當(dāng)然，多道移液槍適合整板樣品的檢測，加酶標(biāo)物、底物、終止液時可整瓶加入。如果只需要對少量樣品檢測時，加酶標(biāo)物、底物、終止液動作一定要迅速、準(zhǔn)確，避免槍頭碰壁或液體濺出。
