可溶性蛋白質(zhì)的定量和定性分析多采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和免疫印跡（Western Blotting）等方法，隨著流式細(xì)胞術(shù)和固相化技術(shù)的發(fā)展和普及，采用流式細(xì)胞術(shù)同樣可以對(duì)可溶性蛋白質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
近些年，基于微球的多指標(biāo)檢測技術(shù)得到廣泛的推廣，與傳統(tǒng)ELISA 技術(shù)只能檢測一個(gè)指標(biāo)相比，該技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)從一份標(biāo)本中同時(shí)檢測多種指標(biāo)，大大提高了科研人員的工作效率。
基于微球的檢測法原理與夾心法免疫測定相同。熒光聚苯乙烯微球被抗原特異的抗體包被。已包被了抗體的微球混合物與樣本孵育。樣本中的待檢物（如細(xì)胞因子等）與微球上包被的抗體結(jié)合。然后加入標(biāo)記的抗體混合物，與結(jié)合于捕獲抗體（微球）的待檢物特異性結(jié)合。加入Streptavidin-PE，結(jié)合。用流式細(xì)胞儀根據(jù)微球大小和熒光標(biāo)記強(qiáng)弱來區(qū)分微球群。2 種大小的微球（4.4μm、5.5μm，如圖一左）內(nèi)部分別標(biāo)記 9、11 種不同強(qiáng)度的熒光染料（如圖一中A、B），構(gòu)成了20 種可以同時(shí)被流式細(xì)胞儀識(shí)別和區(qū)分的不同微球故可以同時(shí)在一份標(biāo)本中進(jìn)行多達(dá)20 種指標(biāo)的檢測。

圖一：微球檢測法原理

優(yōu)點(diǎn)
1) 檢測指標(biāo)多：可選擇使用96 孔板或單個(gè)流試管，每個(gè)標(biāo)本可同時(shí)檢測20 多個(gè)指標(biāo)。
2) 可以自由組合檢測指標(biāo)：研究人員可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，自由組合檢測指標(biāo)，最多可同時(shí)檢測20 個(gè)指標(biāo)。
3) 操作簡單便捷，節(jié)約成本：研究人員可根據(jù)條件選擇使用96 孔濾膜板（試劑盒提供）或者流式管進(jìn)行操作，一次實(shí)驗(yàn)可得到多個(gè)指標(biāo)的結(jié)果，整個(gè)流程只需要3.5 小時(shí)，極大的節(jié)約了人力、物力和時(shí)間成本。
4) 需要標(biāo)本量少：突破傳統(tǒng)的ELISA 對(duì)標(biāo)本需要量大的要求，僅僅25ul 的標(biāo)本就可滿足檢測多個(gè)指標(biāo)的要求。大大節(jié)省標(biāo)本，尤其適用于珍貴標(biāo)本的檢測。
5) 適用標(biāo)本范圍廣：適用于血清、血漿、全血、細(xì)胞培養(yǎng)上清和其它體液。
6) 同樣的靈敏度，更寬的檢測范圍： 在保證等同于（或強(qiáng)于）傳統(tǒng)ELISA的靈敏度的同時(shí)，將檢測范圍擴(kuò)大到了13.7-20000pg/ml，的保證了所有標(biāo)本的適用性。

設(shè)備
貝克曼庫爾特CytoFLEX化繁為簡，的靈敏度能應(yīng)用于各類復(fù)雜的應(yīng)用并適應(yīng)各類型的檢測樣本，將其分析并整合為令人信服的數(shù)據(jù)。對(duì)稀有細(xì)胞和微顆粒檢測所擁有的能力以及兼容各類熒光素搭配，使CytoFLEX在同類產(chǎn)品中處于地位。其可靠的采樣和流體系統(tǒng)設(shè)計(jì)支持微量上樣管的樣本獲取，樣本上樣體積最小達(dá)到10 ul。CytoFLEX在多參數(shù)應(yīng)用中同樣展現(xiàn)出強(qiáng)大實(shí)力，對(duì)微顆粒的檢測大小極限可低至200 nm。

圖二：CytoFLEX八峰微球檢測結(jié)果