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純化小技巧 | “藍膠”用得好,純化沒煩惱

閱讀:2654      發(fā)布時間:2023-10-12
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  Blue 系列的層析介質(zhì)通常也被大家親切稱為“藍膠”,它是將Cibacron Blue共價連接到高度交聯(lián)瓊脂糖基架上而制成的親和層析介質(zhì)。
 
  藍色染料Cibacron Blue可與多種蛋白質(zhì)結(jié)合,如白蛋白、脂蛋白、干擾素、凝血因子;也可與多種酶結(jié)合,如激酶、脫氫酶和大多數(shù)需要含腺苷輔因子的酶(如NAD+)。
 
  Blue Chromstar FF,MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)主要應(yīng)用于白蛋白和干擾素的大規(guī)模純化,酶的分離純化,白蛋白的去除等方面。
 
  參數(shù)介紹 

*結(jié)合載量的測量條件:層析柱:4.7ml預(yù)裝柱;平衡緩沖液:20 mM 檸檬酸, pH 5.5;洗脫緩沖液:50mM磷酸鈉,2M氯化鈉,pH 7;將過量的人血清白蛋白上樣至層析柱,測量人血清白蛋白10%穿透時的動態(tài)結(jié)合載量(QB10)。

**層析介質(zhì)在40℃,pH3-13 環(huán)境下放置7 天后,其理化性質(zhì)和功能沒有明顯變化。
 ***v/v,體積比。
 
 性能表現(xiàn)--載量和回收率 
 
  采用人血清白蛋白作為樣品,對Blue Chromstar FF,MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)的DBC(動態(tài)結(jié)合載量)進行比較。

 

 
  實驗條件如下: 
 
  層析柱:4.7 ml預(yù)裝柱,裝柱高度10 cm,柱體積約4.7 ml
 
  樣品:人血清白蛋白(HSA), 1 mg/mL
 
  平衡緩沖液:20 mM 檸檬酸, pH 5.5
 
  洗脫緩沖液:50mM磷酸鈉,2M氯化鈉,pH 7
 
  流速:151 cm/h
 
  保留時間:5 min

圖1結(jié)合洗脫圖譜【以MaXtar Blue (HS)為例】

表1 Blue Chromstar FF,MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)在QB10的動態(tài)結(jié)合力

 
  百林科可以提供包括Blue Chromstar FF,MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)在內(nèi)的,不同基架、配基密度、結(jié)合載量的“藍膠”,以期為更多用戶的研發(fā)生產(chǎn)提供多樣化選擇。
 
  產(chǎn)品貨號 

 

 
 

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