螢火蟲一步式 Luc 輝光檢測試劑盒的特點:
•靈敏—對螢火蟲熒光素酶活性進行高度靈敏的檢測
• 無味—試劑無臭、無毒,無需在通風(fēng)櫥中操作
• 便利—一步法、混合讀取方案;無需其他試劑
• 穩(wěn)定—與閃光分析相比,信號半衰期更長,穩(wěn)定性更高
• 簡單—不需要使用配備進樣器的光度計
• 適合自動化—適合用于高通量測定
這款輝光型熒光素酶檢測試劑盒專門設(shè)計用于表達適當螢火蟲熒光素酶報告基因酶的載體進行轉(zhuǎn)染的哺乳動物培養(yǎng)細胞。該套件有多個功能使其特別適合用于不帶進樣器的光度計和高通量篩選 (HTS) 應(yīng)用。便利的一步法均一方案盡可能地減少了處理步驟,支持采用自動化技術(shù)。只需將提供的底物溶液和檢測緩沖液混合,即可制成單一工作溶液,然后將其加入含有已轉(zhuǎn)染、已處理細胞的微孔板孔中。該系統(tǒng)的穩(wěn)定信號輸出(輝光)可在孵育時間方面提供靈活性。當與 Thermo Scientific 螢火蟲 Luc 質(zhì)粒一起使用時,該試劑盒提供了一個高度靈敏的生物發(fā)光報告基因測定系統(tǒng),用于對啟動子或通路活性進行檢測。
包括:
檢測緩沖液和底物溶液 (100X)
需要:
螢火蟲熒光素酶和光度計或其他能夠監(jiān)測發(fā)光的儀器(如 Thermo Scientific Luminoskan Ascent 和 Varioskan 閃光微孔板讀數(shù)儀)。
應(yīng)用:
• 用于分析順式和反式作用調(diào)節(jié)元素的啟動子研究
• 藥物篩選
• siRNA 和 miRNA 篩選
• 研究脫靶效應(yīng)的多通路測定
• 蛋白定位報告基因測定
• 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分析
螢火蟲熒光素酶是由甲蟲螢科家族的多個種屬(包括 Photinus 屬和螢屬)天然產(chǎn)生的一種 62kDa 蛋白。Thermo Scientific 紅色螢火蟲熒光素酶的發(fā)射范圍為 560-700nm(λ上限 = 613nm)。螢火蟲熒光素酶的生物發(fā)光信號源自 D-熒光素的氧化。使用光度計捕獲的光輸出可與生成的螢火蟲熒光素酶蛋白的量相關(guān),并可用于確定驅(qū)動螢火蟲熒光素酶表達的啟動子的活性。螢火蟲熒光素酶生物發(fā)光為研究人員提供了一種非放射性測定,用于測定調(diào)節(jié)元素的轉(zhuǎn)錄活性。螢火蟲熒光素酶報告基因活性可用于確定啟動子活性,研究細胞內(nèi)的上游通路活性或確定激活因子或抑制劑的影響。