瓊脂糖的特點:
•漿液—交聯 6% 微珠狀瓊脂糖,在水溶液中呈漿狀
•高容量—可結合至少 40 mg 純化重組 GST 蛋白/毫升樹脂
•高得率和高純度—可持續(xù)純化至少 10 mg GST 標簽蛋白/毫升樹脂,且純度大于 90%
•節(jié)約成本—樹脂價格實惠,可重復使用至少五次且結合容量和純化性能不會降低
• 通用型—可從細菌裂解物中有效純化 GST 融合蛋白或與預純化 GST 標簽蛋白配合使用以降低蛋白相互作用
•兼容性好—經驗證可有效與 Thermo Scientific 細胞裂解試劑配合使用,以從細菌和哺乳動物細胞培養(yǎng)物中進行提取和純化
高質量支持物由組成,通過其中心巰基基團的 12 原子間隔臂固定至交聯 6% 微珠狀瓊脂糖上。使用 (GSH) 瓊脂糖微珠純化 GST 融合蛋白已有完備的文獻支持,并可適用于多種規(guī)模、柱規(guī)格和特殊應用。無論目的是純化來自過表達大腸桿菌裂解物的大量重組蛋白還是研究與 GST 標簽誘餌蛋白有關的蛋白相互作用,Pierce 瓊脂糖均適用于該工作。
Pierce 瓊脂糖可從細菌裂解物(如使用 Thermo Scientific B-PER 細菌蛋白提取試劑獲得的裂解物)中有效純化高水平的過表達 GST 標簽融合蛋白。
Pierce 瓊脂糖可在多種規(guī)模下良好執(zhí)行批量結合和離心柱程序。性能等于或超過其他供應商的常用 GSH 樹脂。
Pierce 瓊脂糖是一種高質量、穩(wěn)定且具有彈性的親和支持物。各種試驗證實在至少五次重復使用后,其性能不會降低。這些數據表明,在正常使用期間,樹脂對結構降解或配體浸出具有高度耐受性。
重組蛋白的表達和純化對于蛋白質調控、結構和功能研究至關重要。大多數重組蛋白均表達為含有短親和性標簽或小蛋白(如 S 轉移酶 (GST))的融合體。該蛋白可在近中性、非變性條件下(如 Tris 緩沖液)與還原型 (GSH) 特異性結合。結合蛋白可使用含自由、還原性 GSH(氧化(GSSH)不適于該目的) 的緩沖液利用競爭性替換輕易解離(洗脫)。當目標蛋白表達為含有 GST 的融合體且固定在固相支持物上時,這種蛋白底物系統(tǒng)可實現重組蛋白的親和純化以及多種其他與這些蛋白相關的實驗。
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