特點(diǎn)包括:
•近中性等電點(diǎn)—pI = 6.3,比天然親和素更偏中性
• 幾乎無糖基化—與天然親和素相比,凝集素結(jié)合的可能性降低
• 無 RYD 識別序列—無已知的脫靶結(jié)合域,與親和素一樣
• 經(jīng)濟(jì)實(shí)惠—價(jià)格顯著低于親和素
NeutrAvidin 蛋白是來自蛋清的去糖基化天然親和素。通過專有工藝去除過量碳水化合物,從而產(chǎn)生一種具有更偏中性的等電點(diǎn)和較少非特異性結(jié)合特性的蛋白。偶聯(lián) NeutrAvidin 蛋白在需要結(jié)合探針的蛋白質(zhì)免疫印跡、ELISA 和 IHC 應(yīng)用中具有出色的性能。NeutrAvidin 蛋白的測定特異性、靈敏度和信噪比通常與昂貴得多的親和素相當(dāng)或更好。
親和素是一種糖蛋白,存在于鳥類、爬行動(dòng)物和兩棲動(dòng)物的蛋清和組織中。該結(jié)合蛋白包含四個(gè)相同的亞單元,其質(zhì)量合計(jì)為 67,000-68,000 道爾頓。親和素去糖基化得到質(zhì)量為 60,000 道爾頓的 NeutrAvidin 蛋白?;谔妓衔锏哪亟Y(jié)合可降低至無法檢測到的水平,但是仍保留結(jié)合親和性。NeutrAvidin 蛋白具有中性 pI 的優(yōu)勢,可較大程度地減少非特異性吸附,同時(shí)賴氨酸殘基仍可用于衍生化或其他定制偶聯(lián)。在已知的結(jié)合蛋白中,NeutrAvidin 蛋白的非特異性結(jié)合率。結(jié)合的比活性約為 14µg/mg 蛋白質(zhì),接近理論活性上限。
應(yīng)用:
• 原位雜交—艾倫腦科學(xué)研究所目前正在使用 NeutrAvidin-AP 偶聯(lián)物創(chuàng)建艾倫腦圖譜。
•蛋白質(zhì)免疫印跡—在蛋白質(zhì)免疫印跡中,使用 NeutrAvidin 蛋白偶聯(lián)物(HRP 或 AP)代替親和素偶聯(lián)物檢測化靶蛋白或化一抗或二抗。
•ELISA—NeutrAvidin 蛋白偶聯(lián)物(HRP 或 AP)取代相應(yīng)的親和素偶聯(lián)物,用于涉及標(biāo)記蛋白和抗體的直接或間接夾心 ELISA 檢測方案。根據(jù)特定測定組分(例如,封閉緩沖液等),NeutrAvidin 蛋白偶聯(lián)物可提供相似或更好的測定性能(以信噪比衡量)。
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