TA Cloning™ 試劑盒(含 pCR™2.1 載體)的特點(diǎn):
•快速且方便 — 15分鐘、室溫連接
•高效 — 藍(lán)/白斑篩選和 >80% 含正確插入片段的克隆體
•靈活 — 可選擇或氨芐抗性,實(shí)現(xiàn)靈活的抗生素選擇
•輕松 — 無需對(duì) PCR 產(chǎn)物進(jìn)行任何酶修飾
•流程簡(jiǎn)化 — 不需要使用包含限制性位點(diǎn)的 PCR 引物
pCR™2.1 載體提供:
• 3'-T 突出端,用于直接連接 Taq 擴(kuò)增 PCR 產(chǎn)物
• T7 啟動(dòng)子,用于體外 RNA 轉(zhuǎn)錄和測(cè)序
• 兩側(cè)具有 EcoR I 位點(diǎn)的通用性多位點(diǎn)接頭,可方便地切除插入片段
• M13 正向和反向引物位點(diǎn),用于測(cè)序
TA Cloning™ 的工作原理
Taq 聚合酶具有非模板依賴性活性,可在 PCR 產(chǎn)物的 3' 末端引入單脫氧腺苷 (A)。該試劑盒中提供的線性化載體具有單個(gè) 3' 脫氧胸苷 (T) 殘基。這使得 PCR 插入片段高效地與載體連接。
試劑盒配置
TA Cloning™ 試劑盒提供多種配置:不含感受態(tài)細(xì)胞(K2020-20 和 K2020-40)、含 One Shot™ INVF' 化學(xué)感受態(tài)大腸桿菌(K2000-01 和 K2000-40)、含 One Shot™ 0F' 化學(xué)感受態(tài)大腸桿菌(K2030-01 和 K2030-40)以及含 One Shot™ 0 化學(xué)感受態(tài)大腸桿菌(K2040-01 和 K2040-40),分 20 和 40 次反應(yīng)試劑盒規(guī)格。