Bac-to-Bac™ C-His TOPO™ 克隆試劑盒

Bac-to-Bac™ 桿狀病毒表達(dá)是一種高效的方法，可用于在昆蟲細(xì)胞中產(chǎn)生高水平蛋白表達(dá)的桿狀病毒。它基于大腸桿菌中位點(diǎn)特異性轉(zhuǎn)座生成重組病毒，而非昆蟲細(xì)胞中的同源重組。新：pFastBacTOPO™ 載體！


可靠和快速蛋白表達(dá)
Bac-to-Bac™ 桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)比傳統(tǒng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)更快且更容易，并且保持高水平的蛋白表達(dá)。Bac-to-Bac™ 基于大腸桿菌中位點(diǎn)特異性轉(zhuǎn)座生成重組病毒，而非昆蟲細(xì)胞中的同源重組。Bac-to-Bac™ 桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)在學(xué)術(shù)文獻(xiàn)中受到高度重視。自 2000 年以來(lái)每年約有 100 次引用！

傳統(tǒng)桿狀病毒系統(tǒng)需要純化和擴(kuò)增起始低滴度的病毒上清液。這需要耗時(shí)的噬斑試驗(yàn)。然而，Bac-to-Bac™ pFastBac™ 載體與 DH10Bac™ 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞中的親本桿粒重組，以形成表達(dá)桿粒。將桿粒轉(zhuǎn)染至昆蟲細(xì)胞，在次轉(zhuǎn)染中快速產(chǎn)生高滴度的純重組桿狀病毒顆粒。您將節(jié)省數(shù)周珍貴時(shí)間。在第 10 天采集純 P2 桿狀病毒儲(chǔ)備液，無(wú)需使用繁瑣的噬斑試驗(yàn)（參見圖 1）

高表達(dá)、易于篩選
pFastBac™ 使用強(qiáng)效多角體蛋白啟動(dòng)子可在各種昆蟲細(xì)胞系（如 Sf9、Sf21 和 High Five™ 細(xì)胞）中產(chǎn)生高水平的表達(dá)。

新添加：
Bac-to-Bac™ pFastBac 載體現(xiàn)在也可以 pFastBacTOPO™ 載體的形式提供。pFastBacTOPO™ 載體是 Blunt™ TOPO™ 載體，隨附 Mach1™-T1R 大腸桿菌，便于克隆和 pFastBac?GOI 增殖。新載體使您能夠：

•使用保真度的 PCR 酶（如 Accuprime™ Pfx SuperMix）擴(kuò)增您的目的基因 (GOI)。

•TOPO™ 僅需 5 分鐘即可將平末端 PCR 產(chǎn)物克隆到新載體中！

•在氨芐選擇性平板上平板接種后 8 小時(shí)可見菌落，因?yàn)榕c其他標(biāo)準(zhǔn)克隆菌株相比，Mach1™-T1R 大腸桿菌細(xì)胞具有更快的倍增時(shí)間。

•使用 Bac-to-Bac™ C-His TOPO™ 克隆或表達(dá)試劑盒，可產(chǎn)生一個(gè)帶有 TEV 切割位點(diǎn)的 C 端 His 融合蛋白，以使用鎳螯合樹脂（Invitrogen ProBond™ 純化系統(tǒng)）進(jìn)行純化，并使用 Invitrogen AcTEV ™ 蛋白酶輔助生成天然蛋白。這是 Invitrogen 僅含 C 端 TEV 切割位點(diǎn)的載體！

新載體將 TOPO™ 克隆技術(shù)與高度受到重視的 Bac-to-Bac™ 桿狀病毒表達(dá)功能相結(jié)合，可實(shí)現(xiàn)輕松克隆及高水平的蛋白表達(dá)。
pFastBacTOPO™ 載體以克隆和表達(dá)試劑盒形式提供。