研究級顯微鏡 IX71/IX81 IX2系列
奧林巴斯IX2倒置顯微鏡與嶄新的UIS2 光學系統(tǒng)相結合,開創(chuàng)了活細胞成像的新世界。
隨著新的熒光技術開發(fā),光激發(fā)和操作的方法在活細胞實驗中日益普及,越來越多的研究人員要求在傳統(tǒng)的可見光譜外使用光損傷較小的近紅外光譜。奧林巴斯公司在IX2系列顯微鏡上使用了嶄新的UIS2光學系統(tǒng),恰如其分地適應了這類要求。這種新型的光學系統(tǒng)有著的信噪比,在更寬的波長范圍內消除色差,有著平坦的高透射率。該系統(tǒng)建立了全新的熒光性能標準,不必損傷細胞,就能有效地檢測到微弱的熒光信號,并且優(yōu)化了多色觀察。IX2倒置顯微鏡能夠在超寬光譜上生成的高質量圖像,是廣大研究人員進行活細胞觀察的理想選擇。
UIS2 光學元件具有的信噪比和用于活細胞熒光成像的光學性能
超高的信噪比,能夠得到的圖像
嶄新的UIS2物鏡的信噪比*,高于現有物鏡50%。這種物鏡的新特性還包括精選了低自發(fā)熒光玻璃(通過全反射鍍膜和連接材料,顯著減少了自發(fā)熒光),提高了數值孔徑,增強了信號亮度。UIS2系統(tǒng)在弱激發(fā)光下,能夠有效探測極弱熒光,從而建立了活細胞熒光成像的新標準。
物鏡 UPLSAPO/100XO 熒光激發(fā)塊 U-MNIBA3 | 物鏡 UPLAPO/100XO 熒光激發(fā)塊 U-MNIBA2 |
高數值孔徑物鏡,用于熒光成像
用于UIS2系統(tǒng)的兩種新物鏡有:PLAPON60XO,它的數值孔徑為1.42,熒光成像;UPLSAPO100XO,適合所有用途。這兩種物鏡都有很高的熒光信噪比,而且都能夠在45mm齊焦距下有非常好的UV激發(fā)效果。UPLSAPO100XO能夠提供直到340nm的高透過率。
擁有更寬波長范圍內的高透過率
IX2系列的內置物鏡采用UW多層鍍膜技術,能夠有效消除超寬譜帶上的反射,在可見光到近紅外光的波長范圍內能夠實現平坦的高透過率,在近紅外和紫外范圍內的透過率顯著提高??傊?,在較寬波長范圍內的性能使它非常適合當今最需要的研究用途。
有效消除直到近紅外范圍的色差
的UIS2物鏡是UPLSAPO系列,它杰出的超級復消色差特點有效地消除了從可見光譜直到1000nm范圍內的色差。這意味著從紫外到紅外范圍內的成像都可以只用一個物鏡實現。這一系列物鏡在使用覆蓋很寬譜帶的熒光進行多色觀察時,可以獲得出色的清晰圖像而不產生顏色偏移。
雙層多光口設計保證了輸入/輸出靈活性
后上光口
后上光口不改變載物臺高度,所以不影響鏡架穩(wěn)定性
這一光口可做光路輸入口,可裝一個附加熒光照明器右側光口
右側光口裝置(IX2-RSPC-2:可選件,視場數:16)帶有一個結像透鏡,可以安裝一個C型接口CCD照相機。后下光口
能夠安裝冷CCD DP30BW與同類設備。左側光口
在這一光口上,原始圖像平面距顯微鏡鏡架102mm,具有很大的靈活性,用以安裝濾色鏡轉盤或者超低0.25X或5X照相機適配器。
與雙光口視頻適配器結合,能夠獲得兩個原始圖像。(可選件)底光口
使用IX2-TVR (T型接口),獲得原始圖像。
雙層光學設計同時兼容近紅外
雙層結構的內部設計有平行光束的輸入輸出以及多光口結構,用以獲取原始圖像。為了讓光譜范圍盡可能地,每層的光路分支都兼容近紅外光譜。即使同時使用多個光口,載物臺高度也不變化。因此,系統(tǒng)的穩(wěn)定性和照明性能保持不變。
提高了近紅外透過率
IX2系列采用UIS2 光學系統(tǒng),提高了側光口、后光口和底光口的紅外透過率,能夠提供多方面的高性能,以適應未來研究的需要。
高主機性能
捕捉高清晰度原始圖像
使用平行光束后,光線可以從后上光口或右側光口捕捉或傳遞。由于UIS2光學系統(tǒng)不需要額外補償(即,補償只通過物鏡透鏡進行),所以能夠捕捉到清晰的原始圖像。*
* “原始圖像”是指光線通過物鏡后聚焦生成的個圖像。沒有光線質量損失,也沒有圖像變差。
V形光路,降低光線損失
為了把反射時的光線損失減少到最小程度,采用了簡單的V形光學結構。這種結構將顯微鏡內部的反射減少到僅僅一次,降低了光線損失,能夠觀察到非常微弱的熒光信號。
熱補償延遲透鏡組件:用于觀察光路的熱補償延遲光學元件,包含帶有不同熱特性的組合透鏡,能夠補償溫度變化造成的模糊
阻止熱膨脹,避免模糊的方法
外接電源:在長時間段延時觀察,環(huán)境溫度變化或者從空調中吹出的空氣將會使顯微鏡產生一些熱形變。由于這種形變會造成模糊,IX2系列設計組對這個問題投入了極大的關注。應對措施包括將透射光照明電源放置到顯微鏡外部,這就減少了內部產生的熱形變,將模糊程度降低到傳統(tǒng)模塊的七分之一。提供各類附件以穩(wěn)定長時間段的延時觀察,例如恒溫培養(yǎng)箱。
鏡體高度穩(wěn)定
為了將各個區(qū)域的穩(wěn)定性,奧林巴斯公司簡化或縮短了從聚焦裝置到物鏡轉換的結構,這就將圖像傳輸階段的扭曲減至最小。在使用物鏡校正環(huán)或諾馬斯基DIC 滑板時順理成章地防止了模糊。
鏡體小巧,便于操作
由于鏡體設計小巧,空間足以在顯微鏡上設計兩側光口,底光口以及后光口,留下的兩側區(qū)域足以很方便地安裝各類周邊設備。使用專用工具,顯微鏡可以安裝到一個防震鏡座上,取下顯微鏡后面的擴展支架后,顯得更加小巧玲瓏。
可變傾角雙目觀察筒U-TBI90
可變傾角雙目觀察筒帶有35—85度傾角。不使用時,觀察筒可以向上翻起并收好,以免突出桌子邊沿??勺儍A角觀察筒可以讓每一個使用人員根據個人情況選擇最輕松的觀察姿勢,同時也可以站立觀察。
無須聚焦的校正環(huán)
新開發(fā)的LUCPLFLN40X(N.A. 0.6, W.D.3.4mm☆)和LUCPLFLN60X(N.A. 0.7, W.D. 1.5---2.2mm)適用于任意厚度的容器。在校正由不同厚度容器所造成的球差時,轉動校正環(huán)不會使聚焦變模糊。校正操作簡單,優(yōu)化了觀察圖像。
新的熒光系統(tǒng)
信噪比提高,能夠有效檢測到非常微弱的熒光
信噪比更高,在熒光觀察時,能夠輸出更明亮、反差更高的圖像
為了地減小細胞損傷或熒光衰減,理想的顯微鏡應該在最小激發(fā)光下進行明亮的、高反差的熒光觀察。為了有效檢測到微弱的熒光信號,必須降低雜散光的噪音。信噪比越高,弱激發(fā)光下的觀察圖像越明亮、越清晰。
增強信號的方法
①高數值孔徑的熒光物鏡。
②與單獨熒光波長特性相吻合的濾色片
降低噪聲的方法
①無自發(fā)熒光的物鏡
②使用不產生熒光光譜交疊的激發(fā)和發(fā)射濾色片組合。
③能阻止雜散光進入的光學系統(tǒng)
④能減少自發(fā)熒光的環(huán)形狹縫照明
熒光觀察組件
低自發(fā)熒光高信噪比物鏡
①使用人員除了可以選擇PLAPON60XO 物鏡(出色的數值孔徑為1.42),還可以選用大量的其它高數值孔徑的物鏡,這類物鏡自發(fā)熒光小,精選玻璃,有助于提高信噪比。
物鏡 | 數值孔徑 | 工作距離(mm) |
UPLSAPO 10X | 0.40 | 3.1mm |
UPLSAPO 20X | 0.75 | 0.6mm |
UPLSAPO 40X | 0.90 | 0.18mm |
UPLSAPO 60XO | 1.35 | 0.15mm |
UPLSAPO 100XO | 1.40 | 0.13mm |
PLAPON60 XO | 1.42 | 0.15mm |
UPLFLN40XO | 1.30 | 0.2mm |
LUCPLFLN 20X | 0.45 | 6.6 — 7.8mm |
LUCPLFLN 40X | 0.60 | 2.7 — 4mm |
LUCPLFLN 60X | 0.70 | 1.5 — 2.2mm |
用于熒光蛋白質的高性能熒光組件
②這一熒光激發(fā)塊組件優(yōu)化了ECFP/EGFP/EYFP/DsRed波長特性,能夠提供高銳利的光譜分割和高透過率,可以讓使用人員快速有效地從熒光蛋白中檢測到熒光。即使在弱激發(fā)光下,也能進行明亮觀察,從而減少了熒光衰減,也地減少了對樣品的損害。
高性能干涉鍍膜熒光激發(fā)塊組件
?、塾捎诓捎昧诵碌腻兡ぜ夹g,激發(fā)和發(fā)射之間的間隙減少6nm,因此,某些干涉鍍膜熒光激發(fā)塊組件的信噪比也提高了。這類熒光激發(fā)塊可有多種選擇,其中包括新型的IGA型熒光激發(fā)塊組件。
高性能熒光激發(fā)塊
新型熒光激發(fā)塊中分光鏡的高銳化鍍膜將激發(fā)濾色片的交叉減少到最小,并且將激發(fā)光的損失減少到傳統(tǒng)模塊的十分之一以下。與光線吸收裝置(可吸收99%以上的雜散光)組合使用,能夠提高信噪比,而不需要任何防止激發(fā)光損失的專用設備。
所有熒光激發(fā)塊組件都帶有雜散光降噪功能。
?、軓娫肼暤囊粋€來源是非常微弱的激發(fā)光(雜散光)不經分光鏡反射就發(fā)生透射。IX2系列熒光激發(fā)塊組件帶有可吸收99%以上這種雜散光的裝置。
環(huán)形狹縫照明裝置,降低了噪聲/IX2-RFRS
⑤自發(fā)熒光產生于透鏡中心,導致光噪聲的產生。但是,這種自發(fā)熒光可以通過在反射光照明孔徑光闌上放一個環(huán)形狹縫來降低。這種環(huán)形狹縫只允許激發(fā)光通過物鏡孔(信噪比提高1.2到3倍)。這種裝置很容易安裝到IX2-RFAL上,只需要簡單地更換環(huán)形狹縫裝置(視場數11),就可以兼容40X、60X和100X油鏡。
Illumination | Normal | Annular |
SIGNAL | 408 | 479 |
NOISE | 36 | 18 |
S/N | 11.3 | 26.6 |
玻璃反射器捕捉多重染色劑熒光
⑥多帶分光鏡通常用于在激發(fā)和吸收一側使用濾色鏡轉盤時,獲取多重染色熒光樣品的多色圖像。但這種分光鏡會碰上這樣一個問題,那就是,由于染色劑數目增加,每種熒光圖像都會變暗,這是因為透過光譜變窄,透過率在狀態(tài)下也要降低到90%以下。因此,奧林巴斯公司開發(fā)了與波長無關的的反射器,能夠在從430nm到700nm的寬波長范圍中具有94%的高透過率。與激發(fā)和發(fā)射一側的濾色鏡轉盤共同使用時,就可以使用多種染色劑,更有效地捕捉熒光圖像?!?正在申請
熒光照明光源,明亮激發(fā)照明,用于細胞觀察/操作
奧林巴斯系列熒光照明裝置適合廣泛的需要,包括多重染色熒光、比例法測量(Ratio)、光漂白及解籠鎖(uncaging)觀察。低放大倍率性能已經大為提高,金屬鹵化物系統(tǒng)帶有預對中的長壽命燈泡選項。
Lamp housings | |||||
Model | Asphericaloptics*1 | Apochromaticlens*2 | Averagelamp life | Lampcentering | IRillumination |
100W mercury apo lamp housing/ U-LH100HGAPO |
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| 300h | Required | Good |
100W mercury lamp housing/ U-LH100HG |
| 300h | Required | Good | |
75W xenon apo lamp housing/U-LH75XEAPO*3 |
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| 200h | Required | Excellent |
50W metal halide lamp housing/ U-LH50MH |
| 2000h | Not required | N/A |
☆1 比起傳統(tǒng)消球差光學元件,能夠更有效集光。
☆2 均勻照明,燈泡聚焦不偏移,即使改變激發(fā)光波長。
☆3 由于采用平坦光源光譜,適合多重染色熒光或比例法成像。
多種反射光熒光照明器供選擇
[L形熒光照明器IX2-RFAL]
這種L形照明器比以前產品能夠提供兩倍亮度,帶有可拆卸的孔徑和視場光闌插件,還帶有能準確進行燈室對中的裝置,有著的系統(tǒng)靈活性。
[熒光照明器IX2-RFA]
比起以前產品,在低放大倍率下,有著2.4倍的亮度(在10X物鏡下進行比較)。這種照明器對于需要強激發(fā)光的用途,或者對于低放大倍率熒光觀察非常理想,內置視場光闌。
[雙光室照明器/IX2-RFAW]
同時使用兩個光源,觀察時可以進行光增強。
[雙燈室附件U-DULHA]
這一適配器允許使用人員同時加裝不同類型的光源,并根據用途交替使用。
IX2-RFA用做反射光熒光照明器。
(光路選擇:100/0,0/100,視場數11)
照明器模塊組件
[方形視場光闌U-RFSS]
這種的光闌允許使用人員在視場內的任何地方控制一個熒光激發(fā)區(qū)域。例如,光漂白和光毒性能夠僅制在需要CCD成像的區(qū)域,提高了整體亮度,也延長了長時間觀察的細胞的壽命。這種光闌安裝在熒光照明器IX2-RFAL的視場光闌位置。
[針孔光闌IX2-RFSPOT]
這種裝置能夠對熒光樣品提供點狀光照明,對于許多實驗都是很有用的,如FRAP,Uncaging等。
這種光闌安裝在L形熒光照明器IX2-RFAL的視場光闌位置。
* 使用市售針孔板。
紅外CCD適配器
這些低放大倍率CCD適配器安裝在左側光口,覆蓋從可見光到近紅外光的波長范圍。
新的微分干涉(DIC)系統(tǒng)
諾馬爾斯基DIC 顯微鏡的簡單原理
光線穿過特殊媒介(例如,水 )中帶有不同折射率的物質(例如,細胞)時,會產生相差。諾馬爾斯基DIC 利用這種相差增強反差。來自顯微鏡光源的光的波動方向與起偏器(聚光鏡側)的光一致,當其通過聚光鏡側的DIC 棱鏡時,就分為直角正交的兩個束光。分裂距離稱做裂劈間隙。當這兩束光線通過帶有不同折射率(例如,細胞)的媒介時,其中一束會發(fā)生延遲;而這兩束光被DIC 滑板(觀察筒側)和檢偏鏡重組時,干涉效應就會產生反差。這就是諾馬爾斯基DIC 的原理。
奧林巴斯公司已經根據裂劈間隙為各種樣品開發(fā)出了理想的DIC 棱鏡。當DIC 反差低時,樣品很難觀察,由于有強烈眩光,高反差也會干擾觀察。因此,奧林巴斯公司開發(fā)了三種不同類型的DIC 棱鏡,能夠對各種樣品進行清晰的觀察。
諾馬爾斯基DIC系統(tǒng)在活細胞觀察中能夠提供分辨率或高對比度
活細胞樣品的厚度從C.elegans之類的線蟲到單層細菌細胞之間變化,這就需要DIC也能隨高反差的厚樣品或幾乎不可見的薄細胞而變化。奧林巴斯提供三種DIC 系統(tǒng),每種的微分間隙都不一樣。DIC 棱鏡在光通過時,微分間隙越大,則最終圖像的反差程度越大。對于厚樣品,小斷層、高分辨率裝置是非常的。對于非常薄的樣品,帶有雙倍普通微分間隙的高反差棱鏡則非常理想。
根據樣品厚度和物鏡放大倍數,選擇的DIC 棱鏡。
新型DIC系統(tǒng)有著廣泛的選擇
可提供大量DIC兼容物鏡。每種聚光鏡棱鏡都適合很多的透鏡,安裝和配置更加容易。
長工作距離聚光鏡IX2-LWUCD
適合從10X到100X放大倍率下進行DIC觀察。
特別是在20X到40X放大倍率下范圍內,可以根據樣品厚度選用高反差或高分辨率。
浸水型DIC聚光鏡IX2-DICD
高性能DIC聚光鏡具有優(yōu)秀的光學性能設計,用于在高放大倍率下方便地觀察樣品。
為了能夠方便地觀察樣品,所有的調節(jié)裝置都安裝在前部,包括棱鏡更換鈕和孔徑控制鈕。可提供三種高數值孔徑的頂透鏡,包括浸水型IX2-TLW,它的數值孔徑為0.9,工作距離為3.7mm,操作器進入角度為40度。
可聚焦的適配器IX-ADUCD
這一聚光鏡適配器允許在IX2上使用正立顯微鏡適配器,包括具有系統(tǒng)靈活性的8孔轉盤式聚光鏡(U-UCD8)。
聚光鏡的光學元件轉換方法是轉盤系統(tǒng),在使用高數值孔徑照明時,能夠進行平滑、方便的轉換,IX2照明柱還可以提供聚光鏡傾斜裝置,以迅速地觀察樣品,而不必傾斜整個照明柱。
滑動式載物臺IX2-GS
滑動式載物臺用于使用指尖迅速轉動樣品。X—Y軸行程為20mm,可轉動360度,C.elegans線蟲之類的樣品就能迅速放到正確位置并排列好,以用于注射或顯微操作。
浮雕相襯和相差的專用裝置
浮雕相襯(RC)裝置
奧林巴斯浮雕相襯系統(tǒng)能夠產生高反差的3D 圖像,類似于DIC效果,可用于塑料器皿中的樣品。浮雕相襯用于細胞受精,使細胞核膜更容易看到和穿刺。
浮雕相襯裝置
☆ 使每一物鏡的陰影方向一致,提高不同倍率下的可操作性。
☆ 聚光鏡(IX2-MLWCD)的長工作距離,以免干擾操作器的工作。
用戶可以在兩個系列的浮雕相襯物鏡中選擇:高性價比的消色差物鏡或高分辨率、高平場性及更好熒光性能的平場半復消色差物鏡。浮雕相襯用的聚光鏡(IX2-MLWCD)也適用于DIC和相襯觀察。
相差觀察(PH)設備
超長工作距離聚光鏡IX-ULWCD,用于相差和明場觀察,工作距離長(73mm),能容下大容器,有著的可操作性。應該與4X-40X相差物鏡組合使用。相差觀察也可以使用IX2-LWUCD 聚光鏡進行,它的工作距離是27mm。
IX81-用于活細胞成像的電動操作系統(tǒng)
通過PC、控制器或顯微鏡鏡體上的操作鈕控制各個功能
IX81功能控制軟件IX2-BSW
使用IX2-BSW*控制軟件,幾乎每一項操作功能都可以通過PC、手動開關和顯微鏡上的操作鈕單獨或多種組合進行。一些圖形分析軟件也可以用于控制顯微鏡操作、圖形捕捉和分析。在這種情況下,所有操作可以通過PC進行。
*包括系統(tǒng)控制器IX2-UCB2。
活細胞成像工作站——進行活細胞觀察時,保持長時間段的穩(wěn)定性
走進21世紀,活細胞和組織的研究成為推動細胞生物學、神經生物學、發(fā)育生物學等生命學科研究的強大引擎。奧林巴斯活細胞成像系統(tǒng)可以實現自由的多維活細胞圖像采集、控制、分析等強大功能;可以充分保證整個活細胞采集過程中光學、電學、溫度、濕度、PH值等多個條件的高度協(xié)調和穩(wěn)定;并在活細胞拍攝過程中保證高清晰、高反差和高速度的成像效果;充分體現了維持細胞生命活性與獲得活細胞圖像的和諧統(tǒng)一。
高級應用系統(tǒng)
顯微操作系統(tǒng)/ON3
低位載物臺設計與低重心相結合,能夠對顯微操作提供*的穩(wěn)定性。使用各種螺絲孔鏡顯微操作器牢固地安裝在顯微鏡上,能夠選擇角度和位置。由于設計小巧,操縱桿能夠放置到地位置。
激光掃描共聚焦系統(tǒng) / FV1000 FLUOVIEW系統(tǒng)
激光掃描共聚焦顯微鏡的基本性能是在將樣品損傷機率降到程度的同時,成像效果明亮:離子沉積鍍膜濾片,緊湊光路;快速:256x256加速掃描16f/s;精確:2 nm光譜分辨率,1nm光譜步進,10nm Z軸步進,可以快速獲取準確的活組織信息。與(可選的)SIM掃描器同時使用時,FV1000能夠實現觀察和光激發(fā)同步,以便同時進行激光激發(fā)和成像。
可以選擇兩種掃描系統(tǒng):的光譜性能,高分辨率和精確性的光譜型;優(yōu)異的性價比,非常適用于生物學觀察的濾光片型。
TIRFM全內反射熒光顯微鏡系統(tǒng)
自1997年以來,奧林巴斯公司全內反射系統(tǒng)的物鏡已經成為市場的,奧林巴斯的TIRFM專用物鏡能讓大約200nm的光通過蓋玻片介面進入樣品。奧林巴斯公司通過提供3種專用TIRFM 物鏡,鞏固了這種,其中包括目前高數值孔徑的物鏡,即100X,N.A. 1.65的物鏡。
由TIRFM 生成的超薄光學層能夠提供信噪比的圖像,一般用于包括氣泡軌跡細胞粘附及單分子運動。
奧林巴斯的高數值孔徑物鏡能夠很容易地產生一個很淺的照明區(qū)域。由于極少光泄露,所以能夠獲得一個黑色背景上的高反差圖像。
圓盤掃描共聚焦顯微鏡系統(tǒng)
奧林巴斯圓盤掃描共聚焦系統(tǒng)(DSU)使用白色、弧光激發(fā)光源和CCD就能提供共聚焦圖像。該系統(tǒng)的核心是由奧林巴斯公司設計的狹縫結構圓盤,能夠提供的光通量和理想的光學斷層或“共焦面”的厚度。
·兼容帶有不同光譜特性的各種激光
由于使用了弧光光源,該系統(tǒng)只需要簡單地轉換標準光鏡組件,就可以適合寬廣波譜范圍的各種熒光應用。
·將激發(fā)光對樣品的損傷降到
激發(fā)光通過圓盤后,強度降低到原來的大約5%。即使這樣,從聚焦樣品表面發(fā)出的熒光也基本無衰減。
·快速構造3D圖像
能夠很快成像,只需要0.1-0.4秒(推薦的CCD曝光時間)。成功重疊拍下的正交圖像,能夠迅速構造3D圖像。
·支持各種放大倍率物鏡
五個DSU圓盤支持狹縫間隙及寬度的變化。因此,圓盤可以參照物鏡的放大倍率和數值孔徑相匹配。DSU支持10×到100×共焦成像。
·共聚焦圓盤移入移出光路可以通過手動控制器或通過軟件進行,所以很容易在DSU和反射光熒光觀察間轉換。