瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒
Prestained Agarose Gel Electrophoresis Kit
產(chǎn)品特點(diǎn)及優(yōu)勢
本產(chǎn)品用于核酸電泳的試劑盒,具有以下特點(diǎn)及優(yōu)勢:
1. 省事:您不用再四處采購瓊脂糖、核酸染料、電泳液和 loading buffer 等試劑,一個(gè)試劑盒全部解決。
2. 省時(shí):為您省去了您親自制膠的繁瑣,為您省出一個(gè)小時(shí)左右的實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
3. 省力:瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠采用特制安全可靠的核酸染料預(yù)染,電泳過程無需電泳液染色或后染色,簡捷方便,即開即用。
4. 省心:用本產(chǎn)品電泳得到的 DNA 片段進(jìn)行膠回收,不影響后續(xù)的 DNA 連接等反應(yīng)。
5. 兼容:瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠為 TAE 體系,與實(shí)驗(yàn)室常規(guī)自制的 TAE 瓊脂糖膠*一致,使用銜接,您只需要用您之前的 TAE 電壓電泳即可。
貨號及成分
1. 瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠 10 塊,規(guī)格:8 孔,每孔最大上樣量:25µl,您有六個(gè)固定濃度可選,對應(yīng)貨號見下表:
當(dāng)然,您也可以同您的供貨商溝通定制您需要的其他濃度!
2. 6×DNA Loading Buffer 一支,貨號:10052,規(guī)格:500µl。6×DNA Loading Buffer 用于瓊脂糖凝膠電泳前 DNA 樣本的處理,使用時(shí)將 1 倍體積的 6×DNA Loading Buffer 與 5 倍體積的 DNA 樣品混合均勻后上樣。緩沖液組分經(jīng)過優(yōu)化,其中的染料溶液包括指示劑溴酚藍(lán)和二甲苯青 FF,電泳時(shí)可肉眼監(jiān)控 DNA 的遷移。甘油確保樣本在點(diǎn)樣孔底部聚集;EDTA 結(jié)合二價(jià)金屬離子并抑制金屬離子依賴性核酸酶。在 1%的瓊脂糖凝膠中,溴酚藍(lán)的遷移率與 300bp 的雙鏈線性 DNA 片段大致相同,二甲苯青 FF 的遷移率與 4000bp 的雙鏈線性 DNA 片段大致相同。
3. TAE 電泳液一瓶,貨號:1060,規(guī)格:60ml/瓶。
TAE 是廣泛使用的核酸電泳緩沖液,主要成分是 Tris-乙酸鹽和 EDTA。DNA 分子在高于等電點(diǎn)的緩沖液中帶負(fù)電,向正極移動(dòng)。TAE 緩沖液常用于基因組 DNA、大分子超螺旋 DNA、擴(kuò)增DNA 片段電泳分離,電泳大于 13kb 的片段時(shí)用 TAE 緩沖液將取得更好的分離效果。
貨 號
10088 10108 10128 10158 10188 10208
濃度
0.8% 1.0% 1.2% 1.5% 1.8% 2.0% MYDEER 使用手冊
運(yùn)輸及保存:
瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒的小黑盒需要 4℃保存和運(yùn)輸,有效期 12 個(gè)月。
6×DNA Loading Buffer 可以短時(shí)間 4℃運(yùn)輸,長期需要-20℃保存,有效期 12 個(gè)月。
TAE 電泳液需要常溫運(yùn)輸和保存,有效期 24 個(gè)月。
自備試劑:
核酸樣品、Marker、去離子水
使用方法:
1. 在低溫條件下 TAE 電泳液會(huì)有沉淀物析出,請 37℃水浴溶解并搖晃均勻后使用,不影響使用效果。用去離子水稀釋 50 倍(1 mL 本產(chǎn)品加 49 mL 去離子水),用作電泳液,倒入電泳槽中,電泳液以沒過膠面 1mm 為宜。
2. 取出一塊獨(dú)立包裝的瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠,撕掉表面的塑料膜,反轉(zhuǎn)包裝,用兩手的食指和中指托住塑料殼邊緣,開口向下沒入電泳液中,然后用兩個(gè)大拇指輕輕按壓塑料殼背面中心部分,瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠就會(huì)落入電泳液中,此時(shí)的預(yù)制膠帶孔面向上,移動(dòng)膠塊,使孔側(cè)端靠近電泳槽負(fù)極。如樣品孔內(nèi)有氣泡,應(yīng)設(shè)法除去。
3. 在 DNA 樣品中加入 6×DNA loading buffer,混勻后,用移液器將樣品混合液緩慢加入被浸沒的凝膠加樣孔內(nèi),同時(shí)加入您自己準(zhǔn)備的 Marker。
4. 接通電源,紅色為正極,黑色為負(fù)極,切記 DNA 樣品由負(fù)極往正極泳動(dòng) (靠近加樣孔的一端為負(fù))。
5. 根據(jù)指示劑泳動(dòng)的位置,判斷是否終止電泳。
6. 電泳完畢,關(guān)閉電源,用凝膠成像儀觀察電泳條帶及其位置,與 Marker 比較擴(kuò)增產(chǎn)物的大小。
電泳膠圖:
100bp 2% 2000bp 1% 1kb 1%
TAE 系列 80v 60min