LC-NMR中采用大量昂貴的氘溶劑來減少HPLC溶劑中的干擾信號(hào)。另外,由于數(shù)據(jù)采樣中出現(xiàn)的靈敏度不足的現(xiàn)象不能在線補(bǔ)償,痕量分析不在NMR的適用范圍內(nèi)。因此,當(dāng)分析物包含了藥物產(chǎn)品中的痕量雜質(zhì),需要采用復(fù)雜的HPLC洗脫處理來收集后續(xù)的分析物適應(yīng)NMR的分析。NMR的Co-Sense系統(tǒng)自動(dòng)完成樣品中此類目標(biāo)化合物的的分離及純化,同時(shí)還可自動(dòng)操作的過程為濃縮、脫鹽、氘溶劑置換等。這有效地減少了LC-NMR檢測時(shí)間并降低了整體操作成本。
特征
全自動(dòng)樣品處理
所有的樣品處理過程,從目標(biāo)化合物的引入、分離、濃縮到脫鹽、溶劑替換再到轉(zhuǎn)移至NMR樣品管中,都是*自動(dòng)進(jìn)行,這增加了操作效率,降低了手工操作帶來的誤差。同時(shí)在線持續(xù)處理即使是處理不穩(wěn)定的樣品也可進(jìn)行穩(wěn)定和可重復(fù)的分析。
高靈敏度檢測
與現(xiàn)有LC-NMR相比,目標(biāo)化合物的濃度可增加幾十倍,可使高通量下短時(shí)間內(nèi)獲取高S / N的 NMR譜。
HPLC參數(shù)的優(yōu)化
HPLC分離參數(shù)是在不考慮后續(xù)的NMR檢測的情況下設(shè)置,在設(shè)置了的分離參數(shù)下可緩解NMR檢測的限制。
輕松操作
此系統(tǒng)由圖形用戶界面軟件控制。操作簡易,系統(tǒng)操作狀態(tài)一覽無余。
溶劑使用減少
在Co-Sense LC-NMR中,在餾分收集階段消耗大量的溶液,僅需極少量的高成本氘代溶劑用來對捕集柱中的目標(biāo)化合物進(jìn)行洗脫,其余可以使用傳統(tǒng)的HPLC溶劑,可減少操作成本。
1. 分離:通過利用制備柱,對目標(biāo)化合物進(jìn)行分離,洗脫液集中在樣品環(huán)中
2. 濃縮:在樣品環(huán)中的洗脫液引入捕集柱進(jìn)而捕集、脫鹽并濃縮。
3.替換:D2O送入捕集柱替代溶液。
4. 洗脫:氘代溶劑送入捕集柱洗脫目標(biāo)化合物,在進(jìn)一步凈化后,洗脫液直接輸送至NMR管。
美國FDA已發(fā)布了一個(gè)指導(dǎo)性草案“遺傳毒性和致癌作用的藥物和產(chǎn)品中的雜質(zhì):推薦方法”,規(guī)定了藥品中對于遺傳毒性雜質(zhì)的限制,這些雜質(zhì)的檢測與正常雜質(zhì)檢測相比,需要高靈敏度的痕量檢測方法。通常,采用質(zhì)譜檢測方法:比如GC/MS或LC/MS常用于雜質(zhì)的高靈敏度檢測。對于通過利用紫外檢測器和其他傳統(tǒng)的檢測器(便于操作并可輕松應(yīng)用在現(xiàn)有的HPLC中)建立一種高靈敏度的定量分析,這種需求越來越多。
法規(guī)要求標(biāo)準(zhǔn)
雜質(zhì)攝取現(xiàn)在每日最多不超過1.5 μg,前提是服藥周期長(12個(gè)月或者更長)
例: 對于30毫克每日用藥量(每天三次,每日10毫克),遺傳性毒素雜質(zhì)需控制在0.005 %(1.5 μg/30 mg × )
*相對于正常的雜質(zhì)含量0.1 %的檢測要求,需要大約靈敏度為其20倍的儀器進(jìn)行檢測。
Co-Sense系統(tǒng)通過進(jìn)行1維液相及隨后的2維液相分離得到雜質(zhì)分離,并通過其在線濃縮捕集,可使其靈敏度增加10到20倍。
與MS相比,它還具備以下兩個(gè)優(yōu)勢:1)不需要特殊的測量技能 2)創(chuàng)建體系的低成本,基于現(xiàn)存LC系統(tǒng)的延展性。專用控制軟件的圖形用戶界面使操作更簡單。
濃縮捕集后利用紫外檢測器(二極管檢測器)實(shí)現(xiàn)定量分析適用于一系列分離環(huán)境,比如磷酸鹽緩沖液和離子對試劑的使用,實(shí)現(xiàn)化合物的高分離以及超痕量雜質(zhì)的超高靈敏度分析。此種方法常推薦應(yīng)用于靈敏度或分離性存在問題的例子中,比如在樣品溶液濃度過低時(shí)或雜質(zhì)化合物誤認(rèn)為是目標(biāo)化合物時(shí)。
特征
捕集濃縮超痕量雜質(zhì)獲取高靈敏度分析。Co-Sense系統(tǒng)僅通過進(jìn)行一維對目標(biāo)雜質(zhì)成分的捕集和隨后的二維分離,其靈敏度大約是單獨(dú)進(jìn)行一維或二維分離的10到20倍。
此圖反映了五種甲酸酯用甲醇溶解后作為測試樣品的連續(xù)性分析結(jié)果。測量結(jié)果展現(xiàn)了優(yōu)質(zhì)的保留時(shí)間和峰面積重復(fù)性。
(2) 2D分離確保痕量雜質(zhì)的可靠性分離
利用一維液相或二維液相不同的保留特點(diǎn),或不同的流動(dòng)相組成,可實(shí)現(xiàn)對痕量雜質(zhì)的可靠性分析及高準(zhǔn)確定量,對于此類痕量雜質(zhì)利用一維液相分離很難將雜質(zhì)中的主要成分進(jìn)行充分分離。
含*的藥物其含量升至0.0008 %,其作為一種偽雜質(zhì)進(jìn)行分析,在濃縮前,藥品中的另外一種雜質(zhì)覆蓋了*色譜峰。濃縮提高靈敏度和分離度,可進(jìn)行高靈敏度、高分辨率的檢測(藥品進(jìn)樣量:1.5 mL的 0.5 mg/mL樣品溶液)
(3)特定控制軟件使任何人都可輕松操作系統(tǒng)
豐富的專業(yè)實(shí)踐和經(jīng)驗(yàn)可有助于設(shè)定二維系統(tǒng)的分離條件并清洗流路。特定控制軟件的圖形用戶界面十分清晰,可使任何人都可操作Co-Sense系統(tǒng)。
生物樣品自動(dòng)預(yù)處理的高靈敏度、創(chuàng)新及有效性分析
HPLC廣泛地應(yīng)用在生物樣品的藥物分析。樣品預(yù)處理情況,以及色譜條件是顯著影響分析精度和靈敏度的重要因素。BA Co-Sense系統(tǒng),結(jié)構(gòu)中包含新研發(fā)出的MAYI-ODS在線SPE柱和在線稀釋流路通道,可自動(dòng)操作從樣品預(yù)處理到樣品分析的所有過程。在線生物樣本的預(yù)處理,比如血清或血漿,可顯著的提高效率,減少分析的人工成本。
在線稀釋旁路
BA Co-Sense系統(tǒng)將稀釋旁路加至樣品引入流路(通至預(yù)處理柱)。將緩沖溶劑樣品加入流動(dòng)相或者添加少量的有機(jī)溶劑可確保蛋白結(jié)合率高的藥品的捕集和濃縮,由此可實(shí)現(xiàn)高效去蛋白質(zhì)以及高回收率。因此,可以實(shí)現(xiàn)對未處理的血清和血漿的直接進(jìn)樣。
SIL-HT高通量自動(dòng)進(jìn)樣器
就樣品進(jìn)樣速度,樣品容量以及減少高吸附樣品化合物的樣品殘留等方面來看,是效能的自動(dòng)進(jìn)樣器。
更多關(guān)于SIL-HT的信息
溫度控制包含預(yù)處理柱控溫
因?yàn)楦邏毫髀非袚Q閥設(shè)置于柱箱,預(yù)處理柱溫度可以精確的控制。對于預(yù)處理柱溫度控制確保了高回收率和精確分析。