DAPI Staining Solution (10ug/ml)
DAPI染色液(10ug/ml)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是適用于常見(jiàn)細(xì)胞和組織細(xì)胞核染色的染色液。DAPI即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride,也稱(chēng)DAPI dihydrochloride,分子式為C16H15N5•2HCl,MW為350.25,CAS:28718-90-3。
DAPI是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,它可以用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色。和EB(ethidium bromide)相比,對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍,DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光。 DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。 DAPI的*大激發(fā)波長(zhǎng)為340nm,*大發(fā)射波長(zhǎng)為488nm;DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后,*大激發(fā)波長(zhǎng)為364nm,*大發(fā)射波長(zhǎng)為454nm。DAPI的發(fā)射光為藍(lán)色,且DAPI和綠色熒光蛋白GFP或Texas Red染劑(紅色熒光染劑)的發(fā)射波長(zhǎng)僅有少部分重疊,可以利用這項(xiàng)特性在單一的樣品上進(jìn)行多重?zé)晒馊旧?/span>
本DAPI染色液為即用型,濃度為10ug/ml,可以直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
使用方法:
1、對(duì)于細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則*行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行DAPI染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的DAPI染色。
2、對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。
3、室溫放置3-5分鐘。
4、吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
5、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
注意事項(xiàng):
1、本DAPI染色液的濃度經(jīng)過(guò)優(yōu)化,確保可以滿(mǎn)足各種常規(guī)染色的需要。
2、熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
3、為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4、DAPI對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
保存條件:
-20℃避光保存,一年有效。