蛋白質(zhì) G 柱Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL(2支/包)的詳細(xì)資料:
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了保健食品中免疫球蛋白 IgG的測(cè)定方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于片劑、膠囊、粉劑類(lèi)型保健食品中免疫球蛋白 IgG的測(cè)定。 本方法檢出限:當(dāng)取樣量 0.1g,稀釋至25mL,進(jìn)樣量20μL時(shí),檢出濃度為0.5mg/mL。 原理 根據(jù)高效親和色譜的原理,在磷酸鹽緩沖液條件下免疫球蛋白 IgG與配基連接,在pH2.5的鹽酸甘氨酸條件下洗脫免疫球蛋白IgG。 試劑 流動(dòng)相 A:pH6.5 0.05mol/L 磷酸鹽
適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了保健食品中免疫球蛋白 IgG的測(cè)定方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于片劑、膠囊、粉劑類(lèi)型保健食品中免疫球蛋白 IgG的測(cè)定。
本方法檢出限:當(dāng)取樣量 0.1g,稀釋至25mL,進(jìn)樣量20μL時(shí),檢出濃度為0.5mg/mL。
原理
根據(jù)高效親和色譜的原理,在磷酸鹽緩沖液條件下免疫球蛋白 IgG與配基連接,在pH2.5的鹽酸甘氨酸條件下洗脫免疫球蛋白IgG。
試劑
流動(dòng)相 A:pH6.5 0.05mol/L 磷酸鹽緩沖液
流動(dòng)相 B:pH2.5 0.05mol/L 甘氨酸鹽酸緩沖液
IgG標(biāo)準(zhǔn)貯備液:稱取IgG標(biāo)準(zhǔn)品(Sigma化學(xué)公司)0.0100g,用流動(dòng)相A(3.1)溶解并定容至10.0mL,搖勻,濃度為1.0mg/mL。
IgG標(biāo)準(zhǔn)系列溶液:取IgG標(biāo)準(zhǔn)貯備液,用用流動(dòng)相A(3.1)稀釋成含IgG 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列。臨用時(shí)配制。
儀器和設(shè)備
高效液相色譜儀具紫外檢測(cè)器和梯度洗脫裝置。
分析步驟
試樣處理:稱取 0.1g(精確至0.001g)試樣,用流動(dòng)相A(3.1)稀釋至25.0mL,搖勻,通過(guò)0.45μm微孔濾膜后進(jìn)樣。
5.2.1 先用5倍柱體積的重蒸水洗柱,再用10倍柱體積的流動(dòng)相A(3.1)平衡柱,進(jìn)樣,按洗脫程序進(jìn)行洗脫。
5.2.2 HPLC參考條件
色譜柱: Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL。
波長(zhǎng): 280nm
進(jìn)樣量: 20μL
梯度洗脫表:
Time Flow mL/min A% B% Gradient
0 0.4 100 0 ※
4.5 0.4 100 0 6
5.5 0.4 0 100 6
15.0 0.4 0 100 6
15.5 0.4 100 0 6
22.0 0.4 100 0 6
蛋白質(zhì) G 柱 | Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL(5支/包) |
蛋白質(zhì) G 柱 | Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL(2支/包) |