PCR實驗室并沒有嚴峻的凈化要求,但是爲避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織方式。同時,要嚴峻控制送、排風的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。大連PCR實驗室建設設計VOLAB
試劑貯存和預備區(qū):該實驗區(qū)主要中止的操作爲貯存試劑的制備、試劑的分裝和混合液的設備。試劑和用于樣品制造的材料應直接運送至該區(qū),不得經過其他區(qū)域。試劑原材料必需貯存在本區(qū)內,并在本區(qū)內制備成所需的貯存試劑。 對與氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴格的要求。
標本制備區(qū):該區(qū)域主要中止的操作爲樣本的保管、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其參與至擴增反響管和測定DNA的分解。 本區(qū)的壓力梯度要求爲:相對于臨近區(qū)域爲正壓,以避免從臨近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可以會發(fā)作氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區(qū)內不必要的走動。
擴增反響混合物配制和擴增區(qū):該區(qū)域主要中止的操作爲DNA擴增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣本制備區(qū))的參與和主反響混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反響混合液等也可在本區(qū)內中止。 本區(qū)的壓力梯度要求爲:相對于臨近區(qū)域爲負壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。爲避免氣溶膠所致的污染,應盡量添加在本區(qū)內的不必要的走動。普通操作如加樣等應在超凈臺內中止。
污染的預防與控制:PCR實驗室設計的中心成果是如何避免污染。在理論義務中,有以下幾種污染類型:擴增產物的污染;自然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標本間的污染。由于一旦發(fā)作污染,實驗就必需中止,直到找到污染源爲止,而且實驗結果必需作廢,需重新中止實驗。所以發(fā)作污染后再圍繞實驗室來尋覓污染源不但耗時而且繁瑣,浪費人力物力。因此要避免污染,首先應是預防,而不是掃除。大連PCR實驗室建設設計VOLAB