近紅外菁染料Cy3-N3|Cy3 azide|花青素-疊氮
菁染料是近紅外熒光染料中zui常用的一類熒光染料,統(tǒng)的可見光染料相比有顯著的優(yōu)勢。由于細胞和組織的自發(fā)熒光在近紅外波段zui小,因此在檢測復雜生物系統(tǒng)時,近紅外染料能提供更高的特異性和靈敏度。同時,由于光波在近紅外區(qū)段的組織透過性更好。菁染料的摩爾吸光系數(shù)在熒光染料中是zui高的,Cy5 hydrazide, Cy5.5 alkyne 和Cy7 NHS ester 的吸收在近紅外區(qū)背景非常低,是熒光強度zui高、zui穩(wěn)定的長波長染料。特別適合于活體小動物體內(nèi)成像代替放射性元素。
目前市面上的菁染料價格比較高,主要是因為菁染料, 尤其是不對稱菁染料的合成副反應多, 副產(chǎn)物極性相近, 產(chǎn)物的分離提純相當困難。菁染料特別是水溶性菁染料分子極性大, 分離提純越加困難。因此像Sulfo Cy5 Carboxylic acid就比脂溶性的Cyanine7 amine這類產(chǎn)品貴一些。水溶性的Sulfo-Cyanine3 NHS ester就比脂溶性Cyanine5 azide更貴一些。
Cyanine菁染料是近紅外熒光染料中zui常用的一類熒光染料,細胞和組織的自發(fā)熒光在近紅外波段zui小,能提供更高的特異性和靈敏度,菁染料是二個非區(qū)域電荷的氮原子通過聚合搭橋的方式形成的一種分子,以下圖片*詮釋:
由于Cy染料的結(jié)構(gòu)式特點,他們往往有著*的消選光系數(shù),數(shù)值高達100,000 Lmol-1cm-1
Cy系列的熒光染料我們一般分為磺酸化菁染料和非磺酸化菁染料non-sulfonated cyanines, and sulfonated cyanines.他們的光譜性質(zhì)基本相同,和蛋白 小分子修飾反應也幾乎是一樣的,不同的在于他們的溶解性,非磺酸化菁染料是脂溶性的,磺酸化菁染料是水溶性的,結(jié)構(gòu)式上也會有些不同。
近紅外菁染料Cy3-N3|Cy3 azide|花青素-疊氮
Non-sulfonated cyanines非磺酸化菁染料包括以下:
Cy3.5 alkyne、Cy3 azide、Cy3 carboxylic acid、Cy3 NHS ester、Cy5 amine、Cy5 maleimide
Cyanine3 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester
Cyanine3.5 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester
Cyanine5 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester amine
Cyanine5.5 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester amine
Cyanine7 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester amine
Cyanine7.5 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester amine
大多數(shù)非磺酸化菁染料都必須在有機相里去跟蛋白、多肽、抗體及小分子材料進行下一步的反應。
Sulfonated cyanine磺酸化菁染料包括以下:
Sulfo-Cy 5 NHS ester, Sulfo-Cy3 maleimide, Sulfo-Cy7 azide, Sulfo-Cy5 carboxylic acid
Sulfo Cyanine3 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester
Sulfo Cyanine3.5 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester
Sulfo Cyanine5 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester amine
Sulfo Cyanine5.5 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester amine
Sulfo Cyanine7 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester amine
Sulfo Cyanine7.5 alkyne azide carboxylic acid hydrazide maleimide NHS ester amine
雖然非磺酸化菁染料和磺酸化菁染料有著相同的熒光特性,但是在具體使用上還是有一些差異性的,非磺酸化菁染料必須溶解在有機溶劑中如DMF或DMSO中使用,并加入緩沖水溶液buffers來使用,磺酸化菁染料溶解在水中,整個使用過程*在水相中進行。
磺酸化菁染料和非磺酸化菁熒光染料可以用于標記各種不同的目標分子:
- 可在有機溶劑中溶解的蛋白質(zhì)
- 抗體 (use 5-10% of DMSO/DMF)
- DNA和寡核苷酸
- 多肽
- 其他小分子,包括藥用小分子及抑制劑
磺酸化菁熒光染料可用于:
- 在DMF或DMSO中變性的敏感蛋白
- 被透析及純化的蛋白
- 水溶性的納米粒子
- 不溶或疏水的蛋白
非磺酸化菁熒光染料可用于:
- 在有機介質(zhì)反應(二氯甲烷、乙腈)
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