人肝細(xì)胞生長因子（HGF）ELISA試劑盒測試

人肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒測試

小知識：影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
特點(diǎn)
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

人肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒測試試驗(yàn)原理：
Glucagons試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知Glucagons濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將Glucagons和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Glucagons的濃度呈比例關(guān)系。

人肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒測試試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標(biāo)板 1塊板（96T） 半塊板（48T） 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標(biāo)準(zhǔn)品：400pg/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按說明書進(jìn)行稀釋
空白對照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型
生物素標(biāo)記的抗Glucagons抗體 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型
洗滌緩沖液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml） 按說明書進(jìn)行稀釋
底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
終止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
標(biāo)本稀釋液 1瓶（12ml） 1瓶（6.0ml） 即用型

自備材料
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒測試操作注意事項(xiàng)
1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8． 加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9． 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒測試

磷鎢酸負(fù)染色液(2%) · 負(fù)染色又稱陰性染色,是相對于普通染色(稱正染色)而言。 · 染色其他 · 100ml · 室溫,避光,12個(gè)月 · 染色后的樣品圖像呈現(xiàn)透明的亮光,而背景圖像呈黑色。pH值為6.8-7.0之間。

ELISA包被緩沖液(1×) · ELISA檢測,又稱為重碳酸鹽緩沖液。 · 免疫檢測 · 100ml · 4℃,3個(gè)月 · 由碳酸鹽,疊氮鈉等組成,ph為9.6。

中性福爾馬林固定液(10%) · 各種組織固定,又稱為中性甲醛溶液。 · 固定液 · 500ml · 室溫,避光,12個(gè)月 · 10%中性福爾馬林也稱為中性緩沖福爾馬林或4%中性甲醛緩沖溶液,主要由甲醛、磷酸鹽等組成,pH值7.2-7.4。

鹽酸胍溶液(8mol/L) · 提取細(xì)胞總RNA實(shí)驗(yàn)中的強(qiáng)烈變性劑,使蛋白質(zhì)變性 · 核酸提取 · 100ml · 室溫,18個(gè)月 · 主要由鹽酸胍、去離子水組成。

MOPS電泳緩沖液(10×,RNase free) · 主要用于RNA電泳 · 核酸電泳 · 500ml · 室溫,避光,6個(gè)月 · 主要由MOPS、乙酸鈉、EDTA、DEPC水等組成,見光易變黃。